在藥品分析方法建立和驗證的過程中，準確度驗證是其中極為重要的一項。作為分析人員，你是否會遇到回收率實驗總不合格，結果忽高忽低？這也許是雜質溶解性在作怪！以下是我在實際工作過程中對于方法建立、化合物溶解性與回收率方面的一些心得，與大家分享。
對于方法建立起初需要對化合物的性質進行預判，對化合物和其相關雜質的溶解度進行考察，以備選擇正確的稀釋液以及稀釋液配比。
如果稀釋液及其比例的選擇不正確，會在分析方法建立之初及方法學驗證階段出現(xiàn)問題。
下面是稀釋液配比不一致，造成回收率試驗波動較大的典型案例：
準確度驗證原方案
第一次：
第二次：
分析原因
?兩次回收率結果檢測不平行，重現(xiàn)性結果差異大。
?增大稱樣量、增大移液體積、更換實驗員操作，排除了人員儀器操作等因素。
?分析實驗方案，對比可知對照品溶液和回收率溶液溶劑配比不一致。
① 空白溶劑：0.1mol/L鹽酸-甲醇（1:9）
②對照品溶液溶劑配比：0.1M鹽酸-甲醇（0.0005ml:0.9995）=（1:1999）
③100%回收率溶液溶劑配比：0.1M鹽酸-甲醇（5.0005ml:44.9995）≈（1:9）
?回收率偏高，原因分析：
對照品溶液中雜質峰面積偏小：雜質在0.1mol/L鹽酸中易溶解，后步稀釋采用甲醇稀釋，可能會導致該雜質析出，從而使對照品峰面積偏??；因此會導致回收率偏大。
結論：雜質與API受溶解度影響較大，肉眼明視溶液澄清，但內在溶解性存在差異，導致回收率重現(xiàn)性差異較大。
驗證試驗
雜質儲備液：精密稱取雜質對照品2mg，置10ml量瓶中，加0.1mol/L鹽酸1ml使溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取1ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得（1000%）
對照品溶液：精密量取雜質儲備液1ml，置10ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻
經(jīng)驗總結
?各雜質與API溶解性在分析方法建立及驗證中微妙變化會影響實驗結果；
?溶劑的選擇、重現(xiàn)性驗證在分析方法建立中尤為重要；
?試驗操作精準，排出操作誤差、設備誤差，更有利于結果分析判斷。
溫馨提示：主成分在稀釋劑中的飽和溶解度，最好滿足飽和溶解度大于3倍的供試品濃度！
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